產(chǎn)品名稱：AF 568 NHS ester的生物標記機制與反應(yīng)活性

1. 核心結(jié)構(gòu)與化學性質(zhì)

分子結(jié)構(gòu)：AF 568 NHS ester（Alexa Fluor 568 NHS ester）由橙紅色熒光染料 Alexa Fluor 568（分子量約445-471）與 NHS酯基團（琥珀酰亞胺酯）共價結(jié)合而成，分子式為 C??H??N?O??S?，分子量約 791.80。其核心結(jié)構(gòu)包含共軛雙鍵體系，末端通過NHS酯與生物分子的氨基（-NH?）反應(yīng)形成穩(wěn)定酰胺鍵。

熒光特性：激發(fā)波長 572-578 nm，發(fā)射波長 598-602 nm（橙紅色熒光），量子產(chǎn)率高，光穩(wěn)定性良好，抗光漂白能力強，在pH 4-10范圍內(nèi)熒光性能穩(wěn)定。

物理性質(zhì)：深紫色固體/粉末，溶于DMSO、DMF、水等溶劑，需避光、-20℃以下干燥保存，避免反復凍融。

2. 生物標記機制與反應(yīng)活性

標記原理：NHS酯基團與生物分子（如蛋白質(zhì)、抗體、核酸、多肽）的伯胺基團（-NH?）發(fā)生特異性共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵，實現(xiàn)熒光標記。反應(yīng)條件溫和（中性pH，室溫），非特異性結(jié)合低。

反應(yīng)優(yōu)化：推薦標記比（Dye/Protein）為2-10:1，反應(yīng)后需通過HPLC或凝膠過濾純化，避免熒光淬滅。

3. 核心應(yīng)用場景

生物成像與檢測：

流式細胞術(shù)：標記抗體用于細胞表面蛋白定量、細胞周期分析、凋亡檢測（如Annexin V聯(lián)用）。

免疫熒光/免疫組化：標記抗體用于細胞內(nèi)蛋白定位、組織切片染色，適配共聚焦顯微鏡。

Western Blot：替代酶標抗體，直接生成熒光信號，避免化學發(fā)光底物局限性。

熒光原位雜交（FISH）：標記DNA/RNA探針，用于基因表達分析、染色體定位。

多色熒光分析：與FITC、Cy3、Cy5等染料聯(lián)用，實現(xiàn)多靶標同步檢測（如橙紅-綠色-近紅外通道）。

活細胞標記：低細胞毒性，適用于活細胞動態(tài)追蹤（如細胞遷移、內(nèi)吞作用）。

4. 優(yōu)勢與局限性

優(yōu)勢：

高靈敏度與穩(wěn)定性：熒光信號明亮持久，光穩(wěn)定性優(yōu)于傳統(tǒng)染料（如FITC），適合長時間成像。

生物相容性：水溶性好，pH穩(wěn)定性強，對生物分子活性影響小。

反應(yīng)特異性：NHS酯與氨基的高效結(jié)合，非特異性結(jié)合低。

局限性：

合成與成本：需精確控制反應(yīng)條件，成本較高。

溶解性限制：需有機溶劑輔助溶解，水相標記需優(yōu)化條件。

光淬滅風險：強光照射或長時間曝光可能導致信號衰減，需使用抗淬滅封片劑。

供應(yīng)商：西安昊然生物

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