一、液態(tài)LAMP的“生存危機”：

• 酶活衰減快：液態(tài)LAMP試劑中，Bst酶在25℃下存放1周，擴增效率下降40%；37℃加速老化后，14天內(nèi)活性基本歸零（某企業(yè)內(nèi)部測試數(shù)據(jù)）。

• 引物易“打架”：非特異性雜交隨儲存時間累積，30天后引物二聚體比例從初始的2%攀升至15%，直接導(dǎo)致假陽性率飆升。
  運輸損耗高：液態(tài)試劑對顛簸敏感，模擬運輸振動測試中，10%的樣本出現(xiàn)組分沉淀，復(fù)溶后擴增失敗率增加30%。

  
  

  二、LAMP凍干-“保留生物活性”

通過“低溫凍結(jié)→真空升華與解析”的過程，將液態(tài)試劑轉(zhuǎn)化為固態(tài)粉末，同時能高效保留生物活性。它的核心價值，在于構(gòu)建了一個“時間暫停艙”：

水分控制：凍干后試劑含水量應(yīng)≤2%，這樣幾乎可以阻斷了酶的水解反應(yīng)和引物的氧化降解。

• 結(jié)構(gòu)保護：二糖、多元醇、聚合物等保護劑、賦形劑，通過玻璃態(tài)基質(zhì)包裹活性成分，避免冰晶生長對酶蛋白的物理破壞（預(yù)凍階段通過程序降溫將冰晶控制在微米級）。

• 復(fù)溶即活：固態(tài)粉末遇水30秒內(nèi)全部溶解，組分均勻性偏差＜5%，復(fù)溶后擴增效率與新鮮液態(tài)試劑無顯著差異。

最終目的是凍干后的LAMP試劑在室溫下可長期穩(wěn)定儲存，效期內(nèi)儲存仍能保持有效活性，打破冷鏈運輸與儲存限制。

三、凍干開發(fā)主要解決三個“平衡術(shù)”

1. 酶活保留VS凍干損傷：保護劑與溫度曲線的優(yōu)化

2. 復(fù)溶效率VS粉末形態(tài)：骨架設(shè)計的優(yōu)化

3. 儲存壽命VS成本控制：穩(wěn)定性的優(yōu)化

凍干雖抑制了大部分反應(yīng)，但dNTPs的水解、引物的氧化仍會緩慢發(fā)生。通過加速老化試驗（初步估計37℃或42度/RH 75%存放30-45天可模擬1-2年常溫，需針對實際情況具體分析），需驗證活性保留率＞90%、LOD（低檢測限）變化＜10倍，才能確認長期儲存可靠性。

四、凍干LAMP試劑“合格”的三大黃金標(biāo)準

• 活性零損失：凍干前后對標(biāo)準品的擴增效率（Ct值差異＜1）、特異性（無交叉反應(yīng)）需一致。

• 現(xiàn)場抗造：模擬苛刻條件（如模擬高低溫包裝運輸震蕩測試等），復(fù)溶后擴增成功率仍＞98%。

• 長期耐用：如常溫儲存12個月后，檢測結(jié)果與新鮮試劑的符合率＞85-90%。
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