
辛酸鈉是為了使人血白蛋白制品變得穩定的添加物。本文使用GC-2050(FID 檢測器)建立了人血白蛋白中辛酸含量的標準曲線定量分析方法。結果表明,本方法辛酸的回收率高,重復性良好,操作簡單便捷,分析速度快,適用于人血白蛋白中辛酸含量的測定。
關鍵詞:氣相色譜儀 GC-2050 SH-PolarD 人血白蛋白 辛酸鈉
01
實驗部分
1.1
儀器
氣相色譜儀:GC-2050(FID 檢測器)
1.2
分析條件
GC 參數:
色譜柱:
SH-PolarD, 30m x 0.25 mm x 0.25 μm
柱溫程序:恒溫 160°C (15 min)
進樣口溫度:230°C
進樣方式:分流進樣,分流比30:1
進樣量:1μL
載氣:氮氣
載氣控制方式:恒線速度,40 cm/sec
檢測器:FID
檢測器溫度:250°C
空氣流量:200mL/min
氫氣流量:32mL/min
尾吹氣流量:24mL/min
02
樣品前處理

03
結果與討論
3.1
標準品譜圖
辛酸標準品色譜圖和化合物信息分別見圖1和表1。


3.2
標準曲線與檢出限
精確量取辛酸及庚酸標準儲備液適量,加入4mL 三氯甲烷,溶劑揮干后用 0.1 mL 三氯甲烷復溶,配制成濃度為1500、3000、4500、6000、7500μg/mL 的系列標準工作液;內標濃度為 3000 μg/mL。以濃度比為橫坐標,峰面積比為縱坐標進行線性擬合,制作標準曲線。根據1500 μg/mL標樣數據,以3倍信噪比計算各目標組分的儀器檢出限,標準曲線見圖 2,線性相關系數、檢出限、分離度及拖尾因子見表2。


3.3
重復性
取1500μg/mL 辛酸標準溶液1μL 進氣相色譜儀,連續進樣6次,以目標物峰面積考察儀器重復性,結果如表3。

3.4
樣品及加標測試結果
配制人血白蛋白樣品至40g/L濃度,按照步驟2進行處理后上機檢測。
計算方法:辛酸鈉含量(mmol/g 蛋白)=辛酸量(μg)×稀釋倍數/[ 取樣量(mL)×1000×144.22× 蛋白含量(g/mL)]
儀器測試結果見表4,樣品色譜圖見圖3。樣品加標濃度水平為 0.053 mmol/g,平行制樣三次,平均回收率測試結果見表4。


04
結論
本文使用GC-2050(FID檢測器)建立了人血白蛋白中辛酸鈉的分析方法。結果表明,在1500~7500μg/mL的濃度范圍內,辛酸線性相關系數R大于0.999。取濃度為1500μg/mL的標準溶液重復進樣6次,辛酸峰面積的 RSD 小于 5%,儀器重現性良好。對實際樣品進行加標回收實驗,添加標準品濃度水平為 0.053 mmol/g,辛酸平均回收率為117.4%。該方法靈敏度高、重復性好,簡單便捷,可用于人血白蛋白中辛酸鈉含量的測定。

極性固定相:鍵合交聯?酸性修飾的Carbowax?聚乙二醇。
專用柱用于非衍生短鏈有機酸及部分無機酸類。
耐氧化損傷。
相當于USP G25和G35固定相。

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