光吸收酶標儀是一種基于紫外-可見光吸收原理的高通量檢測儀器,廣泛應用于生物化學、分子生物學、藥物篩選和臨床診斷等領域。它能夠快速、準確地測量微孔板中樣品的吸光度,適用于ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)、細胞增殖分析、蛋白質(zhì)定量等多種實驗。本文將詳細介紹它的工作原理、技術特點、性能參數(shù)及其在科研與工業(yè)中的應用。
1.光吸收酶標儀的工作原理:
1.光源系統(tǒng):
-通常采用氙燈、鹵鎢燈或LED光源,覆蓋紫外(UV,200-400 nm)和可見光(VIS,400-700 nm)范圍。
-部分機型配備單色器或濾光片系統(tǒng),可選擇特定波長(如340 nm、450 nm、620 nm等)。
2.光路設計:
-垂直光路:光從微孔板上方垂直照射,適用于透明底微孔板。
-水平光路:光從側(cè)面穿透樣品,適用于不透明或高濃度樣品檢測。
3.檢測系統(tǒng):
-光電倍增管(PMT)或光電二極管陣列(PDA)檢測透射光強度。
-通過計算樣品孔與空白孔的吸光度差值,得出目標物質(zhì)的濃度。
4.數(shù)據(jù)處理:
-內(nèi)置軟件自動分析數(shù)據(jù),支持動力學分析、標準曲線擬合和多波長檢測。
2.光吸收酶標儀的主要技術特點
(1)高通量檢測
-可同時檢測96孔、384孔甚至1536孔板,大幅提升實驗效率。
-適用于大規(guī)模篩選實驗,如藥物活性測試、基因表達分析。
(2)多波長檢測能力
-支持單波長、雙波長(如450 nm/630 nm,用于ELISA)或多波長掃描(全光譜分析)。
-減少背景干擾,提高數(shù)據(jù)準確性。
(3)高靈敏度和寬動態(tài)范圍
-檢測限低至0.001 OD(光密度單位),適用于低濃度樣品(如核酸、微量蛋白)。
-動態(tài)范圍廣(0-4 OD),可測量高濃度樣本而無需稀釋。
(4)自動化與智能化
-集成機械臂兼容系統(tǒng),支持自動化工作站聯(lián)用。
-智能軟件提供實時數(shù)據(jù)分析、報告生成和實驗優(yōu)化建議。
3.光吸收酶標儀的應用領域
(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
-檢測抗原-抗體結合反應,廣泛應用于疾病診斷(如HIV、乙肝檢測)和生物標志物研究。
(2)細胞增殖與毒性分析
-通過MTT、CCK-8等試劑測量活細胞數(shù)量,用于抗癌藥物篩選和細胞生物學研究。
(3)核酸與蛋白質(zhì)定量
-DNA/RNA濃度測定:260 nm吸光度計算核酸純度(A260/A280比值)。
-蛋白質(zhì)定量:Bradford法(595 nm)或BCA法(562 nm)測定蛋白濃度。
(4)微生物生長監(jiān)測
-通過OD600值(600 nm吸光度)監(jiān)測細菌或酵母培養(yǎng)液的生長曲線。
(5)藥物研發(fā)與質(zhì)量控制
-高通量篩選(HTS)候選藥物分子。
-檢測藥物溶出度、穩(wěn)定性及含量均勻性。
光吸收酶標儀憑借其高通量、高靈敏度和自動化優(yōu)勢,已成為現(xiàn)代生命科學研究和工業(yè)檢測的核心工具。隨著技術的進步,其在精準醫(yī)療、新藥研發(fā)和環(huán)境監(jiān)測等領域的應用將進一步擴展,為科學研究與產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供更強有力的支持。
1.光吸收酶標儀的工作原理:
1.光源系統(tǒng):
-通常采用氙燈、鹵鎢燈或LED光源,覆蓋紫外(UV,200-400 nm)和可見光(VIS,400-700 nm)范圍。
-部分機型配備單色器或濾光片系統(tǒng),可選擇特定波長(如340 nm、450 nm、620 nm等)。
2.光路設計:
-垂直光路:光從微孔板上方垂直照射,適用于透明底微孔板。
-水平光路:光從側(cè)面穿透樣品,適用于不透明或高濃度樣品檢測。
3.檢測系統(tǒng):
-光電倍增管(PMT)或光電二極管陣列(PDA)檢測透射光強度。
-通過計算樣品孔與空白孔的吸光度差值,得出目標物質(zhì)的濃度。
4.數(shù)據(jù)處理:
-內(nèi)置軟件自動分析數(shù)據(jù),支持動力學分析、標準曲線擬合和多波長檢測。
2.光吸收酶標儀的主要技術特點
(1)高通量檢測
-可同時檢測96孔、384孔甚至1536孔板,大幅提升實驗效率。
-適用于大規(guī)模篩選實驗,如藥物活性測試、基因表達分析。
(2)多波長檢測能力
-支持單波長、雙波長(如450 nm/630 nm,用于ELISA)或多波長掃描(全光譜分析)。
-減少背景干擾,提高數(shù)據(jù)準確性。
(3)高靈敏度和寬動態(tài)范圍
-檢測限低至0.001 OD(光密度單位),適用于低濃度樣品(如核酸、微量蛋白)。
-動態(tài)范圍廣(0-4 OD),可測量高濃度樣本而無需稀釋。
(4)自動化與智能化
-集成機械臂兼容系統(tǒng),支持自動化工作站聯(lián)用。
-智能軟件提供實時數(shù)據(jù)分析、報告生成和實驗優(yōu)化建議。
3.光吸收酶標儀的應用領域
(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
-檢測抗原-抗體結合反應,廣泛應用于疾病診斷(如HIV、乙肝檢測)和生物標志物研究。
(2)細胞增殖與毒性分析
-通過MTT、CCK-8等試劑測量活細胞數(shù)量,用于抗癌藥物篩選和細胞生物學研究。
(3)核酸與蛋白質(zhì)定量
-DNA/RNA濃度測定:260 nm吸光度計算核酸純度(A260/A280比值)。
-蛋白質(zhì)定量:Bradford法(595 nm)或BCA法(562 nm)測定蛋白濃度。
(4)微生物生長監(jiān)測
-通過OD600值(600 nm吸光度)監(jiān)測細菌或酵母培養(yǎng)液的生長曲線。
(5)藥物研發(fā)與質(zhì)量控制
-高通量篩選(HTS)候選藥物分子。
-檢測藥物溶出度、穩(wěn)定性及含量均勻性。
光吸收酶標儀憑借其高通量、高靈敏度和自動化優(yōu)勢,已成為現(xiàn)代生命科學研究和工業(yè)檢測的核心工具。隨著技術的進步,其在精準醫(yī)療、新藥研發(fā)和環(huán)境監(jiān)測等領域的應用將進一步擴展,為科學研究與產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供更強有力的支持。
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