色譜柱是色譜分析的核心組件,其分類與選擇需綜合考慮結構、填料性質及分析需求。以下是詳細分類與選擇要點:
一、色譜柱的分類
?按結構分類?
?填充柱?:柱內填充固定相顆粒,適用于大多數常規分析?。
?開管柱?(如毛細管柱):內徑小(0.2-0.5mm),靈敏度高,但載樣量低?。
?形狀差異?:包括直管形、盤管形、U形等,不同形狀影響分離效率與系統壓力?。
?按分離模式分類?
?反相色譜柱?(如C18):適用于非極性至中等極性化合物,占日常分析主導地位?
。?正相色譜柱?:用于極性化合物分離,填料通常為硅膠或極性鍵合相?
。?離子交換色譜柱?:針對帶電化合物,如蛋白質或離子型藥物?
。?按用途分類?
?分析型色譜柱?:內徑4.0-4.6mm,常規實驗室分析?。
?制備型色譜柱?:內徑5-50mm,用于大規模純化?。
?保護柱?:延長分析柱壽命,攔截雜質?。
二、色譜柱的選擇要點
?填料基質?
?硅膠基質?:pH耐受范圍2-8,適合小分子化合物,但高pH下易溶解?。
?聚合物基質?:耐寬pH(1-14)及高溫(>80℃),適合大分子,但柱效較低?。
?物理參數?
?粒徑?:1.5-10μm,粒徑越小分離度越高,但壓力越大?。
?孔徑?:大孔(>100?)適合大分子,小孔(<100?)適合小分子?。
?碳覆蓋率?:高覆蓋率增強疏水性,改善非極性化合物保留?。
?化學性質?
?鍵合類型?:如C18、苯基等,需根據化合物極性選擇?。
?封端處理?:減少堿性化合物拖尾,尤其高pH分析時需高封端柱?。
?應用場景適配?
?堿性化合物?:選擇高封端或特殊封端硅膠柱?。
?快速分析?:短柱(15-100mm)降低運行時間?。
?高靈敏度需求?:窄徑柱(≤2.1mm)提高檢測限?
三、維護與性能評估
? 性能參數?:理論塔板數、不對稱因子、重現性等需定期測試?。
? 維護建議?:避免pH/溫度,使用前需平衡柱壓?。
通過以上分類與選擇原則,可針對具體分析目標優化色譜柱性能?
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