一、液相色譜儀日常保養5大核心技巧
流動相管理:脫氣與過濾雙保險
脫氣:流動相需預先通過超聲波脫氣或在線脫氣裝置處理,避免氣泡進入泵系統導致壓力波動或基線噪聲。例如,使用氦氣脫氣法可去除80%的溶解氧,但國內實驗室更常用在線脫氣模塊(低成本、低故障率)。
過濾:所有流動相(尤其是含緩沖鹽的溶液)需經0.45μm微孔濾膜過濾,防止顆粒堵塞單向閥或色譜柱入口篩板。若使用HPLC級溶劑,可省略過濾步驟,但緩沖鹽溶液必須過濾。
泵系統維護:密封圈與單向閥是關鍵
密封圈保養:泵密封圈磨損會導致漏液或壓力波動,建議每6個月更換一次。若發現灰黑色沉積物(密封墊磨損)或黃色/綠色污漬(微生物污染),需縮短更換周期。
單向閥清洗:用異丙醇超聲清洗單向閥10-15分鐘,去除鹽析出或雜質堵塞。若清洗后壓力仍不穩,需更換單向閥。
色譜柱保護:反沖與保存規范
反沖操作:僅限生產商明確允許的色譜柱(如納譜分析ChromCore系列)進行反沖,以清除柱頭雜質。反沖時流速需低于常規分析流速,避免填料結構破壞。
長期保存:色譜柱應充滿乙腈或甲醇,兩端用堵頭密封,防止溶劑揮發導致填料干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內過夜,否則鹽析出會永久損壞色譜柱。
檢測器清潔:流通池與燈源管理
流通池清洗:每天分析結束后,用異丙醇或6M硝酸溶液沖洗檢測池,避免鹽析出或樣品殘留堵塞。若基線出現規律性波動,可能是氣泡進入流通池,需用異丙醇沖洗檢測器。
燈源壽命:紫外燈壽命約2000小時,接近時限時需通過儀器軟件測試燈能量(低、中、高波長段)。若某波長段能量不足,需更換燈源。
進樣系統防污染:交叉污染與針密封墊維護
自動進樣器:啟用洗針功能,用初始比例流動相清洗進樣針內外表面,避免高濃度或吸附性樣品殘留。若峰面積重現性差,檢查樣品瓶液面是否充足或瓶蓋是否過緊(導致吸樣不準)。
手動進樣器:使用LC專用進樣針,進樣后立即清洗針內外表面,避免樣品在針座或流通閥上沉積。
二、故障排查與解決方案
柱壓異常:波動、升高或降低
壓力波動:
原因:泵內有氣泡、單向閥堵塞、密封圈磨損。
解決:重新排氣(大流量沖洗泵)、超聲清洗單向閥、更換密封圈。
壓力升高:
原因:色譜柱堵塞、保護柱失效、流動相粘度過高。
解決:反沖色譜柱(若允許)、更換保護柱、改用低粘度溶劑(如乙腈替代甲醇)。
壓力降低:
原因:系統漏液、流速設定過低、色譜柱選擇不當。
解決:檢查接頭連接、調整流速、更換合適色譜柱。
基線噪聲與漂移
基線噪聲:
原因:氣泡進入流通池、檢測器燈能量不足、流動相污染。
解決:用異丙醇沖洗檢測器、更換燈源、過濾或更換流動相。
基線漂移:
原因:柱溫波動、流動相不均勻、流通池污染。
解決:穩定室溫、使用混合器確保流動相均勻、清洗流通池。
譜圖異常:保留時間漂移或峰形變形
保留時間漂移:
原因:室內溫度變化、流動相成分變化、色譜柱未平衡。
解決:控制室溫、使用新鮮配制的流動相、延長色譜柱平衡時間。
峰形變形(拖尾或展寬):
原因:色譜柱污染、進樣量過大、流動相pH不當。
解決:清洗或更換色譜柱、減少進樣量、調整流動相pH至填料耐受范圍(如硅膠基質柱pH 2-9)。
三、液相色譜儀長期維護建議
記錄維護歷史:建立儀器日志,記錄每次維護日期、內容、更換耗材型號及異常情況,便于追蹤性能變化。
定期校準:每季度校準檢測器靈敏度、泵流速精度及柱溫箱溫度,確保數據準確性。
備件管理:儲備常用耗材(如密封圈、單向閥、色譜柱入口篩板),避免因等待備件導致停機。
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