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小鼠心肌細(xì)胞具有特殊的電生理特性，包括自律性、傳導(dǎo)性和收縮性。其中，自律性指的是某些部位的心肌細(xì)胞能夠自發(fā)產(chǎn)生節(jié)律性的電活動，如竇房結(jié)區(qū)域的起搏細(xì)胞。這些自動去極化的電信號隨后通過傳導(dǎo)系統(tǒng)擴散到整個心臟，形成有序的心電活動，確保心臟以穩(wěn)定的節(jié)奏跳動。
在電信號的刺激下，心肌細(xì)胞內(nèi)的肌原纖維發(fā)生縮短，導(dǎo)致細(xì)胞整體收縮。這種有序的收縮將心腔內(nèi)的血液擠出，推送至動脈系統(tǒng)，為全身各組織器官提供氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)。與此同時，舒張期的松弛則允許心室重新充盈血液，準(zhǔn)備下一次射血周期。
小鼠心肌細(xì)胞的測定步驟：
1.樣本采集與處理
-取材：通常選取新生2~3天的乳鼠(如C57或SD品系)，通過外科手術(shù)快速取出心臟組織。操作時需用消毒劑(如新潔爾滅、碘酒和酒精)對皮膚進行嚴(yán)格滅菌，并在無菌條件下開胸取心。
-酶解分離細(xì)胞：將心臟置于含混合消化液(常用胰蛋白酶聯(lián)合膠原酶)的離心管中進行消化，使心肌細(xì)胞從組織中游離出來。消化時間需根據(jù)實驗優(yōu)化，以確保細(xì)胞活性與產(chǎn)量平衡；隨后通過過濾、離心等步驟純化細(xì)胞懸液。
-活力與純度檢測：采用臺盼藍(lán)染色法評估細(xì)胞存活率(應(yīng)>95)，并通過α-actin免疫熒光染色鑒定心肌細(xì)胞的特異性標(biāo)志物以確認(rèn)純度。
2.體外培養(yǎng)與觀察
-接種前準(zhǔn)備：建議使用包被基質(zhì)(如明膠)的培養(yǎng)皿促進貼壁生長，調(diào)整適宜的接種密度以提高成活率和功能穩(wěn)定性。
-培養(yǎng)條件控制：推薦使用DMEM/F12培養(yǎng)基，添加胎牛血清(FBS)、青霉素及鏈霉素等成分維持營養(yǎng)供給和抑菌環(huán)境。定期更換培養(yǎng)液并監(jiān)測pH值、溫度等參數(shù)。
3.功能分析實驗設(shè)計
-根據(jù)研究目的選擇相應(yīng)指標(biāo)，例如通過生物力學(xué)裝置測試收縮特性、凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平檢測或信號通路激活狀態(tài)分析等。可結(jié)合藥物干預(yù)或缺血預(yù)處理模型進一步探究機制。
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