DAB顯色試劑盒是一種基于辣根過氧化物酶(HRP)催化反應(yīng)的顯色試劑盒，廣泛應(yīng)用于免疫組化、原位雜交、Western Blotting、Southern Blotting、Northern Blotting及EMSA等實(shí)驗(yàn)中，用于檢測(cè)HRP標(biāo)記的抗體或探針結(jié)合的靶標(biāo)。
DAB顯色試劑盒操作步驟(以組織切片為例)
樣本準(zhǔn)備：
組織切片經(jīng)抗原修復(fù)、封閉后，與HRP標(biāo)記的抗體孵育。
洗滌：
用TBS或PBS洗滌3-5次，每次3-5分鐘，去除未結(jié)合抗體。
配制DAB工作液：
按比例混合A液(濃縮DAB)與B液(稀釋液含H?O?)，混勻后避光備用。
顯色：
滴加DAB工作液覆蓋樣本，室溫避光孵育1-10分鐘，顯微鏡下觀察顯色情況。
終止反應(yīng)：
用蒸餾水洗滌1-2次，去除殘留顯色液。
后續(xù)處理：
必要時(shí)用蘇木素復(fù)染細(xì)胞核，脫水透明后封片觀察。
注意事項(xiàng)：
安全防護(hù)：
DAB及H?O?具有潛在致癌性，操作時(shí)穿實(shí)驗(yàn)服、戴手套，避免直接接觸皮膚或吸入。
避免背景：
顯色前確保充分洗滌，減少非特異性結(jié)合。
若背景過深，可縮短顯色時(shí)間、降低抗體濃度或使用更強(qiáng)洗滌液。
顯色控制：
顯色液需現(xiàn)配現(xiàn)用，避光保存。
顯色時(shí)間根據(jù)靶標(biāo)豐度調(diào)整，避免過度顯色導(dǎo)致信號(hào)飽和。
兼容性驗(yàn)證：
首使用時(shí)建議預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定最佳抗體濃度和顯色時(shí)間。
會(huì)員.png)
4
立即詢價(jià)
您提交后，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)