手性色譜柱的幾種分類
閱讀:128 發布時間:2025-9-2
手性色譜柱的工作原理基于手性化合物分子與手性固定相之間的特異性相互作用,這些相互作用包括氫鍵、偶極-偶極作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用等。手性識別通常需要至少三種相互作用共同作用,這些作用通過影響包埋復合物的形成或特殊位點與分析物的鍵合,改變手性分離結果。由于這些作用力較微弱,因此需要仔細調節和優化流動相和溫度以達到最佳分離效果。
根據手性固定相和溶劑的相互作用機制,手性色譜柱可分為以下幾種類型:
刷型(Brush型或Prikle型):
發展源于Bill Prikle及其同事的研究,根據三點識別模式設計。
刷型手性固定相分為π電子接受型和π電子提供型兩類。π電子接受型固定相可分離許多可提供π電子的芳香族化合物;π電子供給型固定相則適用于具有π電子接受基團的化合物。
優點在于易于合成,具有高的容量因子和選擇因子;但僅對芳香族化合物有效,有時需進行衍生化反應。
纖維素型:
分離作用包括相互吸引的作用及形成包埋復合物。
市售的手性色譜柱為微晶三醋酸基、三安息香酸基、三苯基氨基酸鹽纖維素固定相。
流動相使用低極性溶劑,典型的流動相為異丙醇-正己烷混合物。
種類齊全,可分離多種生物堿和藥物。
環糊精型:
環糊精是通過酶水解淀粉得到的環型低聚糖,分子成錐筒型,構成一個洞穴。
被拆分物的疏水部分能嵌入環糊精洞穴中,形成可逆的、穩定性不同的包合物。
環糊精固定相的選擇性取決于分析物的分子大小。
流動相通常為低極性溶劑,流速較低時分離效果較好。
大環抗生素型:
通過將大環抗生素鍵合到硅膠上制成。
常用的大環抗生素有利福霉素、萬古霉素和替考拉寧等。
性質穩定,可用于多種分離模式,手性分離基于氫鍵、π-π作用、形成包合物、離子作用和肽鍵等多種作用。
蛋白質型:
分離依賴于疏水相互作用和極性相互作用。
常用的蛋白質包括α-酸性糖蛋白、人血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵類粘蛋白等。
流動相通常為pH 4-7的磷酸鹽緩沖液和少量有機相。
載樣量較小,影響了其在制備色譜中的應用。
配位交換型(Ligand exchange型):
通過形成光學活性的金屬絡合物而達到手性分離。
此類固定相由手性氨基酸-銅離子絡合物鍵合到硅膠或聚合物上形成,因此流動相中必須含有銅離子。
主要用于分離氨基酸類化合物,但對β-氨基酸的分離效果不佳。
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