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如何預防豬細胞系污染？
閱讀：44 發布時間：2025-10-14豬細胞系是指從豬的組織中分離并經過初次傳代成功后，能夠持續培養并進行多次傳代的細胞群體。這些細胞系可以用于研究豬的生物學特性、疾病模型、藥物篩選以及異種移植等領域。
預防豬細胞系污染需要采取綜合措施，包括環境控制、操作規范、試劑管理以及生物安全措施。具體來說：
一、環境與設備消毒：
1、?實驗室環境處理
培養室需配備HEPA過濾器維持正壓氣流，每日實驗前紫外燈照射30分鐘以上。
超凈臺使用前用75%乙醇擦拭內部，避免含氯消毒劑腐蝕不銹鋼表面。
2、?設備滅菌
玻璃器皿需干熱滅菌（180℃ 2小時）或高壓滅菌（121℃ 15 psi）。
水浴鍋每周換水并添加專用抑菌劑，培養箱加濕盤使用無菌水。
二、操作規范：
1、個人防護：實驗人員進入細胞培養區域前需更換無菌服，佩戴無菌口罩、手套和鞋套，減少毛發、皮屑等污染物帶入。
2、操作區域消毒：超凈工作臺在使用前應開啟風機和紫外燈進行消毒，操作過程中避免頻繁進出，減少外界污染風險。
3、無菌操作：所有操作應在超凈臺內進行，培養瓶、培養皿的瓶蓋需倒置放置，避免內表面接觸臺面造成污染。
三、試劑與細胞管理：
1、試劑篩選：培養基、血清等需選擇無支原體污染的批次，使用前檢測pH值（正常為7.2-7.4），避免偏酸或偏堿。
2、細胞復蘇與傳代：凍存細胞復蘇后先鏡檢，確認無污染再傳代；傳代時嚴格控制消化時間，避免細胞損傷。
3、抗生素使用：預防性添加青霉素-鏈霉素（100U/mL），但避免長期使用以防耐藥菌產生。
四、生物安全措施：
1、定期監測：對于重要細胞系，定期進行支原體、細菌和真菌的檢測，確保無污染。
2、預防支原體污染：使用支原體祛除試劑，如Zell Shield或mynox，或采用細胞專用支原體祛除噴霧進行環境處理。
3、隔離和消毒：一旦發現污染，立即隔離污染細胞，對環境進行chedi消毒，包括培養箱、工作臺等。
五、特殊注意事項：
1、?豬源病原體防控?：組織樣本可能攜帶PCV2或PRV病毒，需通過PCR篩查。
2、?交叉污染避免?：不同細胞系使用獨立耗材，操作臺分區處理。
六、總結：
預防豬細胞系污染需以“源頭控制+過程管理+監測響應"為核心：
1、嚴格執行無菌操作，定期維護實驗設備；
2、篩選優質試劑，避免使用過期或污染的培養基；
3、建立常態化監測機制，發現異常立即處理。
通過這些綜合措施，可以有效預防豬細胞系的污染，確保實驗的順利進行和豬場的生物安全。?