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小鼠子宮平滑肌細胞實驗注意事項
閱讀：83 發布時間：2025-8-29在小鼠子宮平滑肌細胞實驗中，為確保實驗數據的準確性和可重復性，需特別注意以下操作細節：
?1. 細胞培養環境控制
子宮平滑肌細胞對培養條件較為敏感，需嚴格控制培養箱的溫濕度（37℃、5% CO?）及培養基pH值（7.2-7.4）。建議使用專用平滑肌細胞培養基，并添加適量生長因子（如EGF或胰島素）以維持細胞活性。避免頻繁開閉培養箱，防止環境波動導致細胞狀態異常。
2. 細胞傳代與凍存
傳代時需輕柔消化（建議0.25%胰酶+0.02% EDTA，消化時間不超過3分鐘），過度消化可能導致細胞膜損傷。凍存液應含10% DMSO及高濃度血清（如90% FBS），程序性降溫后轉入液氮保存。復蘇后需靜置培養24小時再換液，以減少滲透壓沖擊。
3. 功能性實驗的干擾因素
若進行收縮功能檢測（如鈣離子成像或肌動蛋白標記），需提前12小時更換無血清培養基以減少血清干擾。藥物處理時需設置空白對照及溶劑對照組（如DMSO濃度需≤0.1%）。注意細胞密度對收縮性的影響，建議在80%融合度時進行實驗。
4. 數據記錄與標準化
同一批實驗需使用相同代次的細胞（建議P3-P5代），并記錄每代細胞的生長曲線。功能性實驗需同步采集陽性對照數據（如乙酰膽堿誘導收縮）。圖像分析建議采用盲法評估，避免主觀偏差。
5. 倫理與生物安全
實驗動物來源需符合倫理審查要求，細胞株需定期檢測支原體污染。廢棄物應經高壓滅菌處理，避免生物污染。
通過規范操作流程、嚴格控制變量，可顯著提升實驗的可靠性，為后續機制研究奠定基礎。