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激光共焦顯微鏡的使用指南
閱讀:58發(fā)布時(shí)間:2025-10-30
激光共焦顯微鏡的使用步驟:
樣品準(zhǔn)備:
生物樣品:需進(jìn)行熒光標(biāo)記(如用熒光染料或熒光蛋白標(biāo)記目標(biāo)結(jié)構(gòu)),確保樣品干燥(或浸在適配緩沖液中)、無氣泡,避免遮擋激光或產(chǎn)生雜散光。
材料樣品:需清潔表面(去除灰塵、油污),若樣品不反光或無熒光,可通過鍍膜(如噴金)增強(qiáng)反射信號(hào),或使用特定染料染色。
儀器操作:
開機(jī)預(yù)熱:開啟激光光源和計(jì)算機(jī),預(yù)熱 30 分鐘(確保激光強(qiáng)度穩(wěn)定),校準(zhǔn)物鏡焦點(diǎn)和針孔位置(保證共焦效果)。
參數(shù)設(shè)置:根據(jù)樣品選擇激光波長(zhǎng)、物鏡倍率和掃描速度;調(diào)節(jié)激光強(qiáng)度和探測(cè)器增益(避免信號(hào)過強(qiáng)飽和或過弱模糊);設(shè)置 Z 軸掃描范圍(確定斷層掃描的深度間隔)。
成像與保存:?jiǎn)?dòng)掃描,獲取二維或三維圖像,通過軟件進(jìn)行圖像處理(如去噪、偽彩上色),保存原始數(shù)據(jù)和處理后的圖像。
安全注意事項(xiàng):不同波長(zhǎng)激光有不同安全等級(jí);禁止在無防護(hù)情況下拆卸激光模塊或調(diào)整光路,防止設(shè)備損壞或人員受傷。
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