激光共焦顯微鏡是怎么工作的？

閱讀：73發(fā)布時(shí)間：2025-10-27

　　激光共焦顯微鏡是一種結(jié)合激光光源與共聚焦技術(shù)的高性能光學(xué)顯微成像設(shè)備，通過(guò)消除非焦點(diǎn)平面雜散光干擾，實(shí)現(xiàn)亞細(xì)胞級(jí)分辨率的三維成像，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、材料科學(xué)及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。

　　激光共焦顯微鏡的核心是 “共焦光路”和 “點(diǎn)掃描成像”，具體過(guò)程分四步：

　　激光聚焦：激光光源經(jīng)激發(fā)濾光片篩選后，通過(guò)物鏡聚焦到樣品的單個(gè)微小點(diǎn)上，激發(fā)樣品產(chǎn)生熒光。

　　信號(hào)收集：樣品發(fā)出的光沿原光路返回，經(jīng)過(guò)分光鏡反射后，進(jìn)入針孔光闌(共焦孔)。只有來(lái)自聚焦點(diǎn)的光才能精準(zhǔn)穿過(guò)針孔，來(lái)自非聚焦層面(如樣品上下層)的雜散光會(huì)被針孔阻擋。

　　點(diǎn)掃描與成像：通過(guò)掃描系統(tǒng)控制激光束在樣品表面逐點(diǎn)、逐行掃描，每個(gè)點(diǎn)的光信號(hào)被光電探測(cè)器接收并轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。

　　三維重構(gòu)：計(jì)算機(jī)將每個(gè)掃描點(diǎn)的信號(hào)轉(zhuǎn)化為像素，組成二維圖像；通過(guò)調(diào)節(jié)物鏡與樣品的距離，獲取不同深度的二維斷層圖像，再經(jīng)軟件疊加重構(gòu)出樣品的三維立體圖像。

　　日常維護(hù)事項(xiàng)：定期清潔物鏡(用鏡頭紙蘸鏡頭清洗液輕輕擦拭)，避免激光直射眼睛(操作時(shí)佩戴專用激光防護(hù)鏡)，保持樣品臺(tái)清潔(防止污染樣品)。

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