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09-10 2015實驗試劑生理鹽水(或PBS)弗氏*佐劑(Freund’scompleteadjuvant,FCA)弗氏不*佐劑(Freund’sincompleteadjuvant,FIA)二甲苯,酒精棉,脫脂棉,2%NaN3實驗設備剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科手術剪(剪血管用)一把,手術刀架,手術刀片,注射器(1ml、10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑18cm)、彎頭止血鉗四把,直頭止血鉗兩把,手術縫合線,塑料放血管,紗布等。實
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09-10 2015實驗原理分子生物研究中,zui常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于轉基因植物拷貝數的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。切口平移法(nicktranslation)當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coliDNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的3'羥基末端。同時該酶具有從5'→3'的核酸外切酶活性,能從切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同時又在切口的3'端補上核苷酸,從而使切口沿著DNA鏈移動,用放射性核苷酸代替原先無放
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09-10 2015實驗原理線粒體是細胞內一種重要細胞器,是細胞進行呼吸作用的場所。細胞的各項活動所需要的能量,主要是通過線粒體呼吸作用來提供的。活體染色是應用無毒或毒性較小的染色劑真實地顯示活細胞內某些結構而又很少影響細胞生命活動的一種染色方法。詹納斯綠B是線垃體的專一性活體染色劑。線粒體中細胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態呈藍綠色,而在周圍的細胞質中染料被還原,成為無色狀態。實驗試劑1.l/300詹納斯綠B染液2.Ringer氏液(哺乳類用)實驗設備1.顯微鏡2.手術器材一套3.解剖盤4.小平皿5.載片6.蓋片7
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10-12 2013DNA段的克隆需要合適的載體,載體或是質粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經過人工改造[地的。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細胞內必須能自主復制,即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復制原點區域內。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆,載體上常有篩選標記,如對抗菌素的抗性,某些基因產物的顯色反應等。一、質粒常用的有pBR322,pUC系列質粒等。(一)pBR322質粒是4362bp的環狀雙鏈DNA載體,有2個抗藥性基因(四環素和
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10-12 2013早期的基因組DNA甲基化分析技術,如SssI甲基轉移酶分析法、氯乙醛反應法、免疫學抗體技術等,已經不能滿足現代表觀遺傳學研究的需求。今年來常用的基因組甲基化的方法有以下兩種。1.甲基化敏感擴增多態性實驗甲基化敏感擴增多態性實驗技術被用于檢測雙向型真菌的DNA甲基化,它是在擴增片段長度多態性技術的基礎上建立起來、基本程序是:提取高質量的基因組DNA,分別用EcoRⅠ/HpaⅡ,EcoRⅠ/MspⅠ兩種酶組合對基因組DNA進行雙酶切,并連上相應的限制性內切酶的接頭,然后以接頭序列設計的預擴增引物,進
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