以下是ProSpec細胞因子的保存注意事項:
1.開蓋前離心處理:收到產品后,在打開管蓋之前務必先進行離心操作。因為凍干粉在運輸過程中可能會飄散并粘貼于管壁或管蓋上,離心可使粘附的蛋白聚集于管底,便于后續溶解。有些小型高速離心機的“Spin”鍵能快速達到良好收集效果;若使用最高轉速為4000-4500rpm的離心機,則需3000-3500rpm離心5min也可行。
2.正確溶解與濃度控制
選用推薦溶液:嚴格按照說明書指定的溶液來溶解凍干粉,不同產品要求的溶解液各異,如重組人IL-4用水溶解,重組人IL-2用20mM醋酸溶解等。切忌隨意用PBS或培養液等不適當的液體代替,否則可能導致蛋白無法全溶解或活性喪失。
控制溶解濃度:將蛋白溶解到說明書標明的特定濃度范圍(如0.1-1.0mg/ml),在此范圍內蛋白穩定性較好。濃度過高可能超過最大溶解濃度導致無法全溶解、出現聚集;濃度過低則會影響蛋白穩定性和活性。
避免振蕩混合:不能用渦旋儀進行快速振蕩,多數情況下用移液槍槍頭輕吹幾下即可使細胞因子或重組蛋白全溶解,對于不易溶解的產品,可放在水平搖床上低速搖一段時間促溶。
3.短期保存條件:用推薦的溶液將細胞因子或重組蛋白重懸到推薦濃度后,放置在2-8℃(冰箱冷藏室),在此條件下其活性最長可保持1周。若實驗周期較短,在此期間每次吸取一定量加入培養體系即可。用戶常將該溶液進一步稀釋后在4℃保存并在1周內用完。
4.ProSpec細胞因子長期保存方法
添加載體蛋白并分裝凍存:如果實驗周期長于一周或一次用不完配制好的溶液,需用含載體蛋白(如0.1%BSA、10%FBS或5%HSA)的溶液進一步稀釋重懸液,然后分裝凍存于-20℃至-80℃。載體蛋白的作用是封閉塑料管壁上的蛋白結合位點,防止蛋白粘附于管壁造成濃度下降和活性降低。稀釋后的細胞因子或重組蛋白可為任意濃度,因大量載體蛋白能保證低濃度下仍維持較高穩定性。注意水不能作為含載體蛋白的溶液。
5.避免反復凍融:反復凍融會破壞蛋白結構和活性,應盡量減少凍融次數。
特殊產品的額外提示:部分產品如人成纖維細胞生長因子-23、人基質細胞衍生因子-1B、小鼠干擾素Y誘導單核細胞因子等,其凍干粉末在室溫可保存3周,也可置于-18℃凍存用于長期保存;重新溶解后可在4℃冷藏保存至少2-7天,若想延長保存時間,同樣建議分裝后置于-18℃凍存,且要避免反復凍融。
6.遵循說明書指導:由于不同批次甚至同一產品的不同規格可能有細微差異,具體的溶解方法、保存條件等均以相應批次的官*說明書為準。在使用前仔細閱讀并嚴格遵循說明書的操作步驟,以確保細胞因子的生物活性和穩定性。

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