液相色譜儀作為現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)室的常用儀器,廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域,其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響科研與生產(chǎn)的決策。然而,若操作不當(dāng),輕則數(shù)據(jù)偏差,重則損壞儀器。掌握合理使用的核心要點(diǎn),是發(fā)揮其效能的關(guān)鍵。
前期準(zhǔn)備是基礎(chǔ)。開(kāi)機(jī)前需檢查流動(dòng)相是否純凈——緩沖鹽溶液需過(guò)濾并超聲脫氣,有機(jī)溶劑需確保無(wú)顆粒雜質(zhì);色譜柱需根據(jù)分析物性質(zhì)選擇(如反相柱、離子交換柱),并確認(rèn)其耐受的pH與壓力范圍;管路連接需緊密無(wú)漏,避免氣泡進(jìn)入系統(tǒng)。此外,儀器開(kāi)機(jī)后需按順序平衡系統(tǒng):先以純水或初始流動(dòng)相沖洗管路,再逐步過(guò)渡至分析所需的流動(dòng)相,待基線平穩(wěn)后再進(jìn)樣。
參數(shù)設(shè)置需精準(zhǔn)。流動(dòng)相流速、柱溫、檢測(cè)波長(zhǎng)等參數(shù)需根據(jù)方法開(kāi)發(fā)階段的優(yōu)化結(jié)果設(shè)定。例如,生物樣品分析常采用低流速(0.8-1.0 mL/min)以減少柱壓;溫度敏感物質(zhì)(如某些抗生素)需通過(guò)柱溫控制(通常25-40℃)提升分離穩(wěn)定性;檢測(cè)波長(zhǎng)則需匹配目標(biāo)化合物的較大吸收峰,避免干擾信號(hào)。進(jìn)樣時(shí),手動(dòng)進(jìn)樣需快速推注,自動(dòng)進(jìn)樣器則需定期校準(zhǔn)進(jìn)樣體積,防止交叉污染。
過(guò)程監(jiān)控不可少。運(yùn)行中需實(shí)時(shí)觀察基線是否平穩(wěn)、峰形是否對(duì)稱(理論塔板數(shù)下降可能提示柱效降低)、壓力是否在色譜柱正常范圍內(nèi)(波動(dòng)超過(guò)10%需排查原因)。若出現(xiàn)異常峰或基線漂移,需立即暫停實(shí)驗(yàn),檢查流動(dòng)相是否過(guò)期、濾頭是否堵塞、色譜柱是否污染。

合理使用液相色譜儀,本質(zhì)是對(duì)儀器性能與分析需求的精準(zhǔn)匹配。只有從準(zhǔn)備到運(yùn)行的每個(gè)環(huán)節(jié)嚴(yán)格把控,才能獲得可靠數(shù)據(jù),延長(zhǎng)儀器壽命,為后續(xù)研究提供堅(jiān)實(shí)支撐。